Zadania do realizacji w trakcie realizacji projektu: Komórki specjalistyczne na małą skalę odgrywają kluczową rolę w wielu chorobach, takich jak nowotworowe komórki macierzyste lub komórki macierzyste w progresji procesów nowotworowych. Wiadomo, że terapia cytostatyczna w przetrwających komórkach nowotworowych zwiększa ekspresję czynników transkrypcyjnych komórek macierzystych nowotworowych, które odgrywają decydującą rolę w rozwoju oporności cytostatycznej, przerzutów i zmniejszonej skuteczności leczenia. W związku z tym rozwój komórek macierzystych lub komórek macierzystych podobnych do komórek macierzystych ma duży wpływ na szanse przeżycia pacjentów. Istnieją jednak bariery techniczne utrudniające badanie tej małej liczby specjalnych komórek, jeżeli wykrycie małych ilości wymaga specjalnego zestawu urządzeń. Z drugiej strony odpowiednie badania wymagają również dostępności specjalnego systemu sprzętu, kontroli jakości sterylnych warunków i tras transportu. Uzasadnia to potrzebę utworzenia specjalistycznego ośrodka badawczego w PTE, aby oddzielić te małe liczby specjalnych komórek, a następnie dowiedzieć się o ich właściwościach. Wpływ mitochondrimu na ekspresję markerów komórek macierzystych. Rozdzielanie komórek macierzystych o wysokiej czystości lub komórek macierzystych jest wykonywane przez przepływomierz, system sortowania komórek, badania metaboliczne przeprowadza się z Seahorsem, a analizę izolowanych niewielkich ilości istniejących komórek wykonuje się w sterylnych warunkach (np. badanie zmian w długoterminowej funkcji mitochondrialnej) za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego (ImageXpress Micro XLS High Content Screening System) podłączonego do termostatu CO2. Mikrocząsteczki i fragmenty błony osocza uwalniane z komórek nowotworowych w wyniku terapii cytostatycznej są związane ze śmiercią komórek i transformacjami komórkowymi, które dostarczają nowych informacji na temat skutków śmierci komórek cytostatyków. Badania te ujawniają rolę mitochondu w przeprogramowaniu cytostatycznych komórek macierzystych lub komórek podobnych do komórek macierzystych i przyczyniają się do zrozumienia możliwości regulacji mitochondrialnej. Wpływ zmian w funkcji mitochondrium na zmiany profilu ekspresji komórek macierzystych nowotworowych lub komórek macierzystych. Powtarzalną izolację RNA i DNA z skromnych komórek wykonuje system automatycznej izolacji DNA RNA AS4500 Maxwell RSC System, a analiza jakości RNA przeprowadzana jest przy użyciu specjalnego sprzętu Agilent 2100 Bioanalyzer do profilu mRNA. Profil mRNA jest mierzony przez system Illumina MiniSeq lub przez system macierzy Affimetrix, walidacja wyników jest efektem przeprogramowania komórek nowotworowych do komórek macierzystych. Ponadto ulepszenia te umożliwiają analizę zmian w profilach ekspresji, co może dostarczyć informacji na temat sposobu usunięcia profilu ekspresji typowego dla komórek macierzystych nowotworowych. Ponadto zbadamy rozwój mutacji wywołanych przez terapię cytostatyczną, proces, który ma ogromne znaczenie w tworzeniu nowotworu i transmisji, który jest testowany z 384 otworem qPCR systemu. Na podstawie tych danych możemy określić mitochondrialne ścieżki transmisji, które prowadzą do mitochondialnej regulacji ekspresji genów. Możliwość kontrolowania stanów mitochondrialnych i potencjału membranowego za pomocą syntetycznych małych cząsteczek. Kilka publikacji wykazało, że mitochondria odgrywają również ważną rolę w utrzymaniu charakteru komórek macierzystych komórek nowotworowych, zwiększając w ten sposób możliwość, że zmiana potencjału błony mitochondrialnej poprzez cząsteczki kierowane do mitochondrium może zmienić charakter komórek macierzystych komórek nowotworowych. W naszych poprzednich badaniach wykazano już, że cząsteczki skierowane do mitochondrium mają pozytywny wpływ na komórki nowotworowe, a mianowicie przenoszą procesy sygnalizacyjne na śmierć komórek. Dane te wskazują na potencjalną rolę cząsteczek kierowanych przez mitochondrium w eliminacji oporności cytostatycznej, takich jak sole fosfonowe związane z N-oksylopirolidyną. W tej dziedzinie posiadamy doświadczenie badawcze, które pozwoli nam z powodzeniem próbować syntezy nowych typów koniugatów zawierających oba elementy konstrukcyjne. Badania te mogą wykazać potencjał chemiczny, dzięki któremu komórki nowotworowe mogą być niszczone, zanim nowotwór rozwinie się w komórki macierzyste. Dalszy rozwój syntetycznego potencjału chemicznego, synteza cząsteczek kierowanych do mitochondrium. Docelowe związki, które powodują destabilizację mitochondrium, obejmują kilka funkcjonalnych kwasów karboksylowych, laktamów, aldehydów, małych związków molowych Kiral, chiralnych bloków budulcowych, których syntezę można osiągnąć z wyprzedzeniem. Tapa nabyte w dziedzinie syntezy związków heterocyklicznych od dziesięcioleci
