Kompiti li għandhom jiġu implimentati matul il-proġett: Iċ-ċelloli speċjalizzati fuq skala żgħira għandhom rwol kritiku f’ħafna mard, bħaċ-ċelloli staminali tal-kanċer jew iċ-ċelloli staminali fil-progressjoni tal-proċessi tal-kanċer. It-terapija ċitostatika f’ċelloli tal-kanċer li jibqgħu ħajjin hija magħrufa li żżid l-espressjoni tal-fatturi tat-traskrizzjoni taċ-ċelloli staminali tal-kanċer, li għandhom rwol deċiżiv fl-iżvilupp ta’ reżistenza ċitostatika, metastasi u tnaqqis fl-effikaċja tal-kura. Għalhekk, l-iżvilupp ta’ ċelloli staminali tal-kanċer jew ċelloli simili għaċ-ċelloli staminali għandu impatt kbir fuq iċ-ċansijiet ta’ sopravivenza tal-pazjenti. Madankollu, hemm ostakli tekniċi għall-istudju ta’ dawn in-numri żgħar ta’ ċelloli speċjali jekk id-detezzjoni ta’ kwantitajiet żgħar teħtieġ sett speċjali ta’ apparati. Min-naħa l-oħra, l-istudji rilevanti jeħtieġu wkoll id-disponibbiltà ta’ sistema apposta ta’ tagħmir, il-kontroll tal-kwalità tal-kundizzjonijiet sterili u r-rotot tat-trasport. Dan jiġġustifika l-ħtieġa li jitwaqqaf ċentru ta’ riċerka speċjalizzat fil-PTE biex jissepara dawn in-numri żgħar ta’ ċelloli speċjali u sussegwentement jitgħallem dwar il-proprjetajiet tagħhom. L-effett ta’ mitochondrim fuq l-espressjoni tal-markaturi taċ-ċelloli staminali. Is-separazzjoni ta’ purità għolja ta’ ċelloli staminali tal-kanċer jew ta’ ċelloli staminali simili ssir permezz ta’ Flow-citometer, sistema li tissortja ċ-ċelloli, l-istudji metaboliċi jsiru b’Seahorse u l-analiżi ta’ ammonti żgħar iżolati ta’ ċelloli eżistenti ssir taħt kundizzjonijiet sterili (eż. eżami ta’ bidliet fil-funzjoni mitokondrijali fit-tul) bl-użu tal-mikroskopju fluworexxenti (ImageXpress Micro XLS High Content Screening system) konness mat-termostat CO2. Mikropartiċelli u frammenti tal-membrana tal-plażma rilaxxati miċ-ċelloli tal-kanċer bħala riżultat ta’ terapija ċitostatika huma assoċjati mal-mewt taċ-ċelluli u t-trasformazzjonijiet taċ-ċelloli, li jipprovdu informazzjoni ġdida dwar l-effetti tal-mewt taċ-ċelloli taċ-ċitostatiċi. Dawn l-istudji juru r-rwol ta’ mitochondium fir-riprogrammazzjoni taċ-ċelloli staminali tal-kanċer ikkaġunati miċ-ċitostatiċi jew ċelloli simili għaċ-ċelloli staminali u jikkontribwixxu għall-fehim tal-possibbiltajiet ta’ regolamentazzjoni mitokondrijali. L-effett tal-bidliet fil-funzjoni tal-mitokondrija fuq il-bidliet fil-profil tal-espressjoni taċ-ċelloli staminali tal-kanċer jew taċ-ċelloli staminali. L-RNA riproduċibbli u l-iżolament tad-DNA minn ċelluli modesti jsiru permezz tas-sistema awtomatika ta’ iżolament AS4500 Maxwell RSC DNA RNA u l-analiżi tal-kwalità tal-RNA ssir bl-użu ta’ Agilent 2100 Bioanalizzatur b’tagħmir speċjali għall-profil mRNA. Il-profil tal-mRNA jitkejjel jew permezz tas-sistema Illumina MiniSeq jew permezz tas-sistema Affimetrix array, il-validazzjoni tar-riżultati hija l-effett tar-riprogrammazzjoni taċ-ċelloli tal-kanċer fiċ-ċelloli staminali. Barra minn hekk, dan it-titjib jagħmilha possibbli li jiġu analizzati l-bidliet fil-profili tal-espressjoni, li jistgħu jipprovdu informazzjoni dwar kif jitneħħa l-profil tal-espressjoni tipiku taċ-ċelloli staminali tal-kanċer. Barra minn hekk, se ninvestigaw l-iżvilupp ta’ mutazzjonijiet indotti minn terapija ċitostatika, proċess li huwa ta’ importanza kbira fil-formazzjoni tat-tumur u t-trażmissjoni, li jiġi ttestjat bis-sistema qPCR ta’ 384 toqba. Abbażi ta ‘din id-data, nistgħu niddeterminaw mogħdijiet ta’ trasmissjoni mitokondrijali li jwasslu għal regolamentazzjoni mitokondrijali ta ‘espressjonijiet tal-ġeni. Il-possibbiltà li jiġu kkontrollati l-istati mitokondrijali u l-potenzjal tal-membrana b’molekuli żgħar sintetiċi. Diversi pubblikazzjonijiet urew li l-mitokondrija għandha wkoll rwol importanti fiż-żamma tal-karattru taċ-ċelloli staminali taċ-ċelloli tal-kanċer, u b’hekk tqajjem il-possibbiltà li l-bidla tal-potenzjal tal-membrana mitokondrijali permezz ta’ molekuli diretti lejn il-mitokondrija tista’ tbiddel il-karattru taċ-ċelloli staminali taċ-ċelloli tal-kanċer. Fl-istudji preċedenti tagħna, diġà ġie indikat li l-molekuli diretti lejn il-mitokondrija għandhom effett pożittiv fuq iċ-ċelloli tal-kanċer, jiġifieri ċ-ċaqliq tal-proċessi ta’ sinjalazzjoni lejn il-mewt taċ-ċelloli. Dan it-tagħrif jindika r-rwol potenzjali ta’ molekuli diretti minn mitochondrium fl-eliminazzjoni ta’ reżistenza ċitostatika, bħal mluħa ta’ phosphonium assoċjati ma’ N-oxylpyrrolidine. F’dan il-qasam, għandna esperjenza ta ‘riċerka li se tippermetti magħna biex b’suċċess jippruvaw is-sinteżi ta’ tipi ġodda ta ‘konjugati li fihom iż-żewġ elementi strutturali. Dawn l-istudji jistgħu juru l-potenzjal kimiku li permezz tiegħu ċ-ċelloli tal-kanċer jistgħu jinqerdu qabel ma l-kanċer jiżviluppa f’ċelloli staminali. Aktar żvilupp tal-potenzjal kimiku sintetiku, sinteżi ta’ molekuli diretti lejn il-mitokondrija. Il-komposti fil-mira li jikkawżaw id-destabbilizzazzjoni tal-mitokondrija jinkludu diversi aċidi karbossiliċi funzjonalizzati, lakta...
