Με αυτό το έργο, συνέχιση άλλων προηγούμενων, στόχος είναι ο εντοπισμός νέων μεταλλάξεων στα γονίδια mtDNA και ο χαρακτηρισμός του παθογόνου μηχανισμού σε μοντέλα μεταμοχοχονδριακών κυβριδίων που περιέχουν ένα πυρηνικό υπόβαθρο νευροβλαστώματος, το οποίο μπορεί να διαφοροποιηθεί στους νευρώνες, και με ανθρώπινα ενήλικα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα, τα οποία μπορούν να διαφοροποιηθούν στους μυς, δεδομένου ότι οι νευρώνες και οι μύες είναι οι ιστοί που επηρεάζονται περισσότερο στις μιτοχονδριακές ασθένειες. Οι μιτοχονδριακές ασθένειες είναι μια σειρά από διαταραχές, με πολύ διαφορετικές κλινικές εκδηλώσεις, οι οποίες έχουν κοινό ότι παράγονται από ελαττώματα στη βιοσύνθεση της κυτταρικής ενέργειας με τη μορφή ΑΤΡ. Η διάγνωση των ασθενών με αυτές τις παθολογίες είναι κακή και η θεραπεία τους είναι πολύ περιορισμένη ή ανύπαρκτη. Το μιτοχονδριακό DNA χαρακτηρίζεται τέλεια και έχει συσχετιστεί με μεγάλο αριθμό σημειακών μεταλλάξεων και διαγραφών που προκαλούν αυτές τις ασθένειες. Ωστόσο, μόνο το 16 % των ασθενών έχουν φτάσει στη γενετική διάγνωση, αφήνοντας τους υπόλοιπους αδιάγνωστους. Στόχος: Ακολουθήστε το πλήρες μιτοχονδριακό DNA (16,569 bp) των δειγμάτων από την τράπεζα DNA μας από ασθενείς με μιτοχονδριακή νόσο, για να βρεθούν νέες μεταλλάξεις που προκαλούν την παθολογία. Επιπλέον, ο παθογόνος μηχανισμός αυτών των μεταλλάξεων θα μελετηθεί μέσω της χρήσης των κυβριδίων των νευρώνων κυττάρων και μυοκυττάρων. Μεθοδολογία: Αλληλουχία πλήρων μιτοχονδριακών γονιδιωμάτων. Ο μηχανισμός της μελέτης για την παθογένεια πρέπει να διεξάγεται με την κατασκευή μεταμοχοχοχονδριακών κυβριδίων που περιέχουν μεταλλαγμένα mtDNA. Θα εκτελέσουν αναλύσεις των διαφόρων παραμέτρων που σχετίζονται με τη μιτοχονδριακή συνάρτηση: ανάπτυξη της γαλακτόζης, δραστηριότητα αναπνευστικής αλυσίδας, παραγωγή ROS, κυτταρική βιωσιμότητα, δυνατότητα μιτοχονδριακής εσωτερικής μεμβράνης, επίπεδα ασβεστίου, επίπεδα ΑΤΡ και σύνθεση, και ανάλυση RNA και πρωτεϊνικής σύνθεσης.