Úkoly, které mají být provedeny v průběhu projektu: Malé specializované buňky hrají zásadní roli v mnoha onemocněních, jako jsou nádorové kmenové buňky nebo kmenové buňky v progresi nádorových procesů. Je známo, že cytostatická terapie u přežívajících nádorových buněk zvyšuje expresi transkripčních faktorů nádorových kmenových buněk, které hrají rozhodující roli ve vývoji cytostatické rezistence, metastáz a snížené účinnosti léčby. Vývoj nádorových kmenových buněk nebo buněk podobných kmenovým buňkám má proto velký vliv na šance pacientů na přežití. Existují však technické překážky pro studium těchto malých množství speciálních buněk, pokud detekce malých množství vyžaduje speciální sadu zařízení. Na druhé straně příslušné studie rovněž vyžadují dostupnost specializovaného systému vybavení, kontrolu kvality sterilních podmínek a přepravních tras. To ospravedlňuje potřebu zřídit specializované výzkumné středisko v PTE s cílem oddělit tento malý počet speciálních buněk a následně se dozvědět o jejich vlastnostech. Účinek mitochondrimu na expresi markerů kmenových buněk. Vysoká čistota separace nádorových kmenových buněk nebo kmenových buněk se provádí průtokoměrem, třídicím systémem buněk, metabolickými studiemi jsou prováděny s Seahorse a analýza izolovaných malých množství existujících buněk se provádí za sterilních podmínek (např. vyšetření změn dlouhodobé mitochondriální funkce) pomocí fluorescenčního mikroskopu (ImageXpress Micro XLS High Content Screening System) připojeného k CO2 termostatu. Mikročástice a fragmenty plazmatické membrány uvolňované z nádorových buněk v důsledku cytostatické terapie jsou spojeny s buněčnou smrtí a buněčnými transformacemi, které poskytují nové informace o buněčných účincích cytostatik na smrt buněk. Tyto studie odhalují úlohu mitochondia při přeprogramování nádorových kmenových buněk indukovaných cytostatikou nebo buněk podobných kmenovým buňkám a přispívají k pochopení možností mitochondriální regulace. Vliv změn funkce mitochondria na změny expresního profilu nádorových kmenových buněk nebo kmenových buněk. Reprodukovatelná izolace RNA a DNA ze skromných buněk provádí automatický systém izolace DNA RNA systému AS4500 Maxwell RSC a analýza kvality RNA se provádí pomocí speciálního zařízení Agilent 2100 Bioanalyser pro profil mRNA. Profil mRNA se měří buď systémem Illumina MiniSeq, nebo systémem Affimetrix, validací výsledků je efekt přeprogramování nádorových buněk na kmenové buňky. Kromě toho tato zlepšení umožňují analyzovat změny v expresních profilech, které mohou poskytnout informace o tom, jak odstranit profil exprese typický pro nádorové kmenové buňky. Kromě toho budeme zkoumat vývoj mutací indukovaných cytostatickou terapií, proces, který má prvořadý význam při tvorbě nádoru a přenosu, který je testován systémem 384 otvorů qPCR. Na základě těchto dat můžeme určit mitochondriální přenosové cesty, které vedou k mitochondiální regulaci genových exprese. Možnost kontroly mitochondriálních stavů a membránového potenciálu pomocí syntetických malých molekul. Několik publikací prokázalo, že mitochondrie také hraje důležitou roli při udržování kmenových buněk nádorových buněk, čímž se zvyšuje možnost, že změna mitochondriálního membránového potenciálu prostřednictvím molekul směřujících do mitochonndria by mohla změnit charakter kmenových buněk nádorových buněk. V našich předchozích studiích již bylo naznačeno, že molekuly směřující do mitochondria mají pozitivní vliv na nádorové buňky, jmenovitě posunutí signalizačních procesů směrem k buněčné smrti. Tyto údaje naznačují potenciální roli molekul řízených mitochondriem při eliminaci cytostatické rezistence, jako jsou fosfonové soli spojené s N-oxylpyrrolidinem. V této oblasti máme výzkumné zkušenosti, které nám umožní úspěšně se pokusit o syntézu nových typů konjugátů obsahujících oba strukturální prvky. Tyto studie mohou ukázat chemický potenciál, prostřednictvím kterého mohou být rakovinné buňky zničeny dříve, než se rakovina rozvine do kmenových buněk. Další vývoj syntetického chemického potenciálu, syntéza molekul směřujících do mitochondria. Cílové sloučeniny, které způsobují destabilizaci mitochondria zahrnují několik funkčních karboxylové acidamidy, laktamy, aldehyd, malé molární hmoty Kiral sloučeniny, chirální stavební bloky, jejichž syntéza může být dosaženo předem. Tapa získal v oblasti syntézy heterocyklických sloučenin po desetiletí
