A) Apresentação das tarefas a executar: O objetivo do projeto é adquirir e operar um conjunto de instrumentos que são adequados para identificar/caracterizar novos compostos orgânicos naturais (plantas, fúngicas e bacterianas) e compostos orgânicos produzidos por síntese química, seus conjugados (derivados diretos, nanopartículas coloidal) e seus metabolitos, bem como para pesquisar alterações do nível de proteína (proteômica) nas células devido à influência dos compostos. No tratamento de doenças tumorais e reinfecciosas de origem microbiana, um avanço importante pode ser feito pela chamada terapia dirigida, o que aumenta a seletividade das substâncias ativas e reduz os seus efeitos colaterais. A característica comum desta nova direção da investigação farmacêutica é a criação de compostos capazes de direcionar a substância ativa para o tumor afetado ou para a célula infetada. A infraestrutura a desenvolver visa o isolamento, a identificação e a caracterização de novos compostos biologicamente ativos produzidos naturalmente (conjugados com peptídeos e/ou nanosistemas) produzidos por síntese química orgânica, em conformidade com os mais elevados padrões internacionais. A grande maioria das substâncias biologicamente ativas atualmente utilizadas em medicina são metabolitos secundários de plantas, fungos e microrganismos de procarioto ou são compostos sintéticos semissintéticos relacionados. Um dos principais objetivos da nossa investigação é identificar e caracterizar novas substâncias ativas e metabolitos de origem vegetal, fúngica ou microrganismo. Com este desenvolvimento infraestrutural, pretendemos ampliar a possibilidade de descobrir substâncias ativas medicinais e tóxicas adicionais de plantas e o perfil de caracterização dos compostos. No decorrer da pesquisa, definimos não só uma substância ativa de um organismo, mas também uma «impressão digital metabolita» cada vez mais fundamental na prática internacional. É importante notar que, de acordo com algumas hipóteses, a maioria das substâncias ativas anteriormente desconhecidas pode ser efetivamente identificada e caracterizada por essa estratégia. Por razões semelhantes, a caracterização metabólica de produtos metabólicos de micróbios que vivem em condições extremas é promissora (profissional responsável: Instituto de Biologia, Departamento de Organização Vegetal, Departamento de Microbiologia). A maioria dos bioconjugados adequados para terapia direcionada consiste em três componentes; substância ativa, molécula de controlo e unidade de interligação. Em nossa pesquisa, tentamos criar lojas compostas nas quais a substância ativa (natural ou sintetizada) e os componentes peptídicos de controle podem ser ligados em uma ampla gama de combinações com os ligadores bifuncionais desenvolvidos, aumentando a gama de conjugados adequados para terapia direcionada, o que também pode ser um pré-requisito para a cura personalizada. Além da identificação e caracterização dos componentes produzidos e dos conjugados produzidos a partir deles, a sua estabilidade, metabolismo e alterações do nível de proteínas induzidas por células nos sistemas biológicos são também essenciais para a medição da sua plataforma analítica altamente permeável e altamente disruptiva (operador profissional: Instituto de Química, MTA-ELTE Peptidchemical Research Group). As duas áreas de investigação acima referidas contam conjuntamente com o dispositivo UHPLC-MS/MS recém-adquirido, que não só é adequado para análises de rotina simples, mas também tem um potencial de investigação significativo. A análise qualitativa e quantitativa dos componentes das amostras pode ser efetuada através de um sistema (HPLC-MS/MS) associado à cromatografia líquida (HPLC) concebido para a colheita, permitindo a determinação da massa de elevada precisão, com deteção de quadrupol e de massa orbitrap. A quantidade de componentes a testar pode variar por ordem de magnitude. O sistema é adequado para a realização de testes de cromatografia líquida ultraeficiente (UHPLC), reduzindo significativamente o tempo de medição, aumentando assim o número de amostras que podem ser processadas e reduzindo o uso de solventes. A identificação e quantificação de substâncias separadas é fornecida por um detetor de díodos (190-800 nm), deteção de espetrometria de massa de alta resolução pelo espectrômetro de massa híbrido quadrupol-orbitrap. Operando em uma ampla faixa de massa (m/z 50-2000) com espectrômetros de massa de alta precisão (menos de 5 ppm) também permitem a identificação estrutural e a identificação do perfil de poluição, fornecendo uma sensibilidade única (attograma). A gravação MS/MS é fornecida por uma célula de impacto HCD de alta energia, que permite a gravação de espetro reprodutível e a identificação de componentes mais segura para pesquisa na biblioteca. Fontes iônicas intercambiáveis (caixa de fonte de íons API com ionização por eletrospray aquecida — fontes de ionização H-ESI II e APCI com sistema de dupla desti...