Projekti käigus täidetavad ülesanded: Väikestel spetsialiseerunud rakkudel on oluline roll paljudes haigustes, nagu vähi tüvirakud või tüvirakud vähiprotsesside progresseerumises. Tsütostaatiline ravi ellujäänud vähirakkudes suurendab teadaolevalt vähi tüvirakkude transkriptsioonifaktorite ekspressiooni, millel on otsustav roll tsütostaatilise resistentsuse, metastaaside ja ravi efektiivsuse vähenemises. Seetõttu mõjutab vähi tüvirakkude või tüvirakkudega sarnaste rakkude areng oluliselt patsientide ellujäämisvõimalusi. Siiski on tehnilisi takistusi nende väikeste erirakkude uurimisel, kui väikeste koguste avastamiseks on vaja spetsiaalseid seadmeid. Teisest küljest nõuavad asjaomased uuringud ka spetsiaalse seadmete süsteemi kättesaadavust, steriilsete tingimuste kvaliteedikontrolli ja transpordimarsruute. See õigustab vajadust luua PTE juures spetsiaalne uurimiskeskus, et eraldada väike arv erirakke ja seejärel õppida tundma nende omadusi. Mitokondri mõju tüvirakkude markerite ekspressioonile. Vähi tüvirakkude või tüvirakkude taoliste rakkude kõrge puhtusastmega eraldamine toimub voolutsitomeetri, rakkude sorteerimise süsteemi abil, metaboolsed uuringud tehakse Seahorse’iga ja eraldatud väikestes kogustes olemasolevaid rakke analüüsitakse steriilsetes tingimustes (nt pikaajalise mitokondriaalse funktsiooni muutuste uurimine), kasutades CO2 termostaadiga ühendatud fluorestsentsmikroskoopi (ImageXpress Micro XLS High Content Screening süsteem). Tsütostaatilise ravi tulemusena vähirakkudest vabanenud mikroosakesed ja plasmamembraanifragmendid on seotud rakkude surma ja rakkude transformatsioonidega, mis annavad uut teavet tsütostaatikumide rakkude surma mõjude kohta. Need uuringud näitavad mitokondiumi rolli tsütostaatilisest indutseeritud vähi tüvirakkude või tüvirakkude taoliste rakkude ümberprogrammeerimisel ning aitavad mõista mitokondriaalse reguleerimise võimalusi. Mitokondriumi funktsiooni muutuste mõju vähi tüvirakkude või tüvirakkude ekspressiooni profiili muutustele. Reprodutseeritavat RNA ja DNA isoleerimist tagasihoidlikest rakkudest teostab AS4500 Maxwell RSC süsteemi DNA RNA isolatsioonautomaatne süsteem ning RNA kvaliteedianalüüs tehakse Agilent 2100 Bioanalyzeri mRNA profiili eriseadmetega. MRNA profiili mõõdetakse kas Illumina MiniSeq süsteemi või Affimetrix massiivsüsteemi abil, tulemuste valideerimine on vähirakkude ümberprogrammeerimise mõju tüvirakkudesse. Lisaks võimaldavad need parandused analüüsida ekspressiooniprofiilide muutusi, mis annavad teavet selle kohta, kuidas eemaldada vähi tüvirakkudele tüüpiline ekspressiooniprofiil. Lisaks uurime tsütostaatilise ravi poolt indutseeritud mutatsioonide arengut, protsessi, mis on tuumori ja ülekande moodustumisel ülimalt oluline, mida katsetatakse 384 augu qPCR-süsteemiga. Nende andmete põhjal saame kindlaks määrata mitokondrilised ülekandeteed, mis viivad geeniekspressioonide mitokondiaalse reguleerimiseni. Võimalus kontrollida mitokondriaalseid olekuid ja membraani potentsiaali sünteetiliste väikeste molekulidega. Mitmed väljaanded on näidanud, et mitokondritel on oluline roll ka vähirakkude tüvirakkude iseloomu säilitamisel, suurendades seega võimalust, et mitokondriaalse membraani potentsiaali muutmine molekulide kaudu, mis on suunatud mitokondriumisse, võib muuta vähirakkude tüvirakkude iseloomu. Meie varasemates uuringutes on juba näidatud, et molekulidel, mis on suunatud mitokondriumi, on positiivne mõju vähirakkudele, nimelt signaalimisprotsesside nihutamine rakkude surmale. Need andmed näitavad mitokondriumi suunatud molekulide võimalikku rolli tsütostaatilise resistentsuse, näiteks N-oksülpürrolidiiniga seotud fosfooniumisoolade elimineerimisel. Selles valdkonnas on meil teadusuuringute kogemus, mis võimaldab meil edukalt proovida sünteesida uut tüüpi konjugaate, mis sisaldavad mõlemat struktuurielementi. Need uuringud võivad näidata keemilist potentsiaali vähirakkude hävitamiseks enne vähi muutumist tüvirakkudeks. Sünteetilise keemilise potentsiaali edasiarendamine, molekulide süntees, mis suunatakse mitokondriumi. Mitokondriumi destabiliseerimist põhjustavad sihtühendid on mitmed funktsionaalsed karboksüülhappeamiidid, laktaamid, aldehüüd, väikese molaarmassiga Kiraali ühendid, kiraalsed ehitusplokid, mille sünteesi on võimalik eelnevalt saavutada. Tapa omandatud valdkonnas sünteesi heterotsükliliste ühendite aastakümneid
