A) Præsentation af de opgaver, der skal udføres: Formålet med projektet er at erhverve og drive et sæt instrumenter, der er egnede til at identificere/karakterisere nye naturlige (plante-, svampe- og bakterielle) organiske forbindelser og organiske forbindelser fremstillet ved kemisk syntese, deres konjugater (direktivderivater, kolloid nanopartikler) og deres metabolitter samt til forskning i ændringer i proteinniveau (proteomik) i celler som følge af forbindelsers indflydelse. Ved behandling af både tumorer og reinfektiøse sygdomme af mikrobiel oprindelse kan der opnås et stort gennembrud ved såkaldt målrettet behandling, hvilket øger selektiviteten af aktive stoffer og reducerer deres bivirkninger. Det fælles træk ved denne nye retning for farmaceutisk forskning er dannelsen af forbindelser, der er i stand til at målrette det aktive stof mod den berørte tumor eller inficerede celle. Den infrastruktur, der skal udvikles, har til formål at isolere, identificere og karakterisere nye naturligt producerede biologisk aktive forbindelser (konjugater med peptid og/eller nanosystemer), der produceres ved organisk kemisk syntese, i overensstemmelse med de højeste internationale standarder. Langt størstedelen af de biologisk aktive stoffer, der i øjeblikket anvendes i medicin, er sekundære metabolitter af planter, svampe og procaryotemikroorganismer eller er beslægtede halvsyntetiske syntetiske forbindelser. Et af hovedformålene med vores forskning er at identificere og karakterisere nye aktive stoffer og metabolitter af plante-, svampe- eller mikroorganismeoprindelse. Med denne infrastrukturudvikling sigter vi mod at udvide muligheden for at opdage yderligere medicinske og toksiske planteaktive stoffer og karakteriseringsprofilen for forbindelserne. I løbet af forskning definerer vi ikke kun et aktivt stof i en organisme, men også et stadig mere grundlæggende "metabolit-fingeraftryk" i international praksis. Det er vigtigt at bemærke, at ifølge nogle hypoteser kan de fleste af de hidtil ukendte aktivstoffer identificeres og karakteriseres effektivt ved denne strategi. Af lignende årsager er metabolisk karakterisering af metaboliske produkter af mikrober, der lever under ekstreme forhold, lovende (professionel ansvarlig: Institut for Biologi, Institut for Planteorganologi, Institut for Mikrobiologi). De fleste biokonjugater, der er egnede til målrettet behandling, består af tre komponenter; aktivt stof, kontrollerende molekyle og forbindelsesenhed. I vores forskning forsøger vi at skabe sammensatte butikker, hvor det aktive stof (naturligt eller syntetiseret) og kontrollerende peptidkomponenter kan knyttes sammen i en bred vifte af kombinationer med de udviklede bifunktionslinkere, hvilket øger udvalget af konjugater, der egner sig til målrettet terapi, hvilket også kan være en forudsætning for personlig helbredelse. Ud over identifikation og karakterisering af de fremstillede komponenter og de konjugater, der fremstilles af dem, er deres stabilitet, metabolisme og ændringer i de biologiske systemers proteinniveau også afgørende for målingen af deres yderst gennemtrængelige, stærkt forstyrrende analyseplatform (professionel operatør: Institut for Kemi, MTA-ELTE Peptidchemical Research Group). De to ovennævnte forskningsområder er i fællesskab afhængige af den nyligt indkøbte "skærekant" UHPLC-MS/MS-enhed, som ikke kun er egnet til enkle rutineanalyser, men også har et betydeligt forskningspotentiale. Kvalitativ og kvantitativ analyse af prøvernes komponenter kan udføres ved hjælp af et system (HPLC-MS/MS) forbundet med væskekromatografi (HPLC), der er konstrueret til udtagning, og som muliggør bestemmelse af masse med høj nøjagtighed, med quadrupol og orbitrapmassedetektion. Mængden af komponenter, der skal afprøves, kan variere efter størrelse. Systemet er velegnet til udførelse af ultraeffektive væskekromatografitest (UHPLC), hvilket reducerer måletiden betydeligt, hvilket øger antallet af prøver, der kan behandles, og reducerer brugen af opløsningsmiddel. Identifikation og kvantificering af separerede stoffer sker ved hjælp af en diodearraydetektor (190-800 nm), massespektrometri med høj opløsning ved det hybride quadrupol-orbitrapmassespektrometer. Drift over et bredt masseområde (m/z 50-2000) med høj præcision (mindre end 5 ppm) massespektrometre giver også mulighed for strukturel identifikation og identifikation af forureningsprofil ved at give en unik følsomhed (attogram). MS/MS-optagelse leveres af en højenergi-HCD-slagcelle, som muliggør reproducerbar frekvensoptagelse og en mere sikker komponentidentifikation til bibliotekssøgning. Udskiftelige ionkilder (API-ionkildehus med opvarmet elektrosprayionisering — H-ESI II- og APCI-ioniseringskilder med dobbelt destillationssystem) gør det muligt at undersøge molekyler af en bred vifte af strukturer. De vigtigste egenskaber, der er anført, gør instrumentet egnet til hurtig "høj kapacitet" analyse af et stort antal prøver. A
