А) Представяне на задачите, които трябва да бъдат изпълнени: Целта на проекта е да се придобие и експлоатира набор от инструменти, които са подходящи за идентифициране/характеризиране на нови естествени (растителни, гъбични и бактериални) органични съединения и органични съединения, произведени чрез химичен синтез, техните конюгати (директивни производни, колоидни наночастици) и техните метаболити, както и за изследване на промените на протеиновото ниво (протеомика) в клетките поради влиянието на съединенията. При лечението както на туморни, така и на реинфекциозни заболявания с микробен произход, може да се направи голям пробив чрез така наречената насочена терапия, която увеличава селективността на активните вещества и намалява техните странични ефекти. Общата характеристика на тази нова посока на фармацевтичните изследвания е създаването на съединения, които са в състояние да прицелят активното вещество в засегнатия тумор или инфектирана клетка. Инфраструктурата, която ще бъде разработена, има за цел изолирането, идентифицирането и характеризирането на нови естествено произведени биологично активни съединения (конюгати с пептид и/или наносистеми), произведени чрез органичен химичен синтез, в съответствие с най-високите международни стандарти. По-голямата част от биологично активните вещества, които понастоящем се използват в медицината, са вторични метаболити на растения, гъбички и прокариотни микроорганизми или са свързани полусинтетични синтетични съединения. Една от основните цели на нашето изследване е да идентифицираме и характеризираме нови активни вещества и метаболити с растителен, гъбичен или микроорганичен произход. С това инфраструктурно развитие се стремим да разширим възможността за откриване на допълнителни лечебни и токсични растителни активни вещества и характеризационния профил на съединенията. В хода на изследванията определяме не само активно вещество на организма, но и все по-фундаментален „метаболит“ в международната практика. Важно е да се отбележи, че според някои хипотези повечето от неизвестните преди това активни вещества могат ефективно да бъдат идентифицирани и характеризирани с тази стратегия. Поради подобни причини метаболитната характеристика на метаболитните продукти на микробите, живеещи в екстремни условия, е обещаваща (професионална отговорна: Институт по биология, Катедра по растителна органиология, Катедра по микробиология. По-голямата част от биоконюгатите, подходящи за целева терапия, се състоят от три компонента; активно вещество, контролираща молекула и свързваща единица. В нашите изследвания се опитваме да създадем съставни магазини, в които активното вещество (естествено или синтезирано) и контролиращите пептидни компоненти могат да бъдат свързани заедно в широк спектър от комбинации с разработените двуфункционални свързващи вещества, увеличавайки гамата от конюгати, подходящи за целева терапия, което също може да бъде предпоставка за персонализирано лечение. В допълнение към идентифицирането и характеризирането на произведените компоненти и произведените от тях конюгати, техните стабилност, метаболизъм и предизвикани от клетките промени на протеиновото ниво в биологичните системи също са от съществено значение за измерването на тяхната високопропусклива, силно разрушителна аналитична платформа (професионален оператор: Институт по химия, MTA-ELTE Peptidchemical Research Group). Горепосочените две научноизследователски области съвместно разчитат на новозареденото устройство UHPLC-MS/MS, което е подходящо не само за обикновени рутинни анализи, но и има значителен изследователски потенциал. Качественият и количественият анализ на компонентите на пробите може да се извършва с помощта на система (HPLC-MS/MS), свързана с течна хроматография (HPLC), проектирана за доставка, позволяваща определяне на масата с висока точност, с откриване на квадрупол и орбитапна маса. Количеството на компонентите, които трябва да бъдат изпитвани, може да варира в зависимост от големината. Системата е подходяща за извършване на свръхефективни тестове за течна хроматография (UHPLC), като значително се съкращава времето за измерване, като по този начин се увеличава броят на пробите, които могат да бъдат обработени, и се намалява използването на разтворители. Идентифицирането и количественото определяне на отделените вещества се осигурява от детектор с диодна решетка (190—800 nm), масспектрометричен детектор с висока разделителна способност от хибридния квадрупол-орбитрап масспектрометър. Работещи в широк обхват на масата (m/z 50—2000) с висока точност (по-малко от 5 ppm) масспектрометри също дават възможност за идентификация на конструкцията и идентифициране на профила на замърсяване чрез осигуряване на уникална чувствителност (аттограма). Записът на MS/MS се осигурява от високоенергийна HCD ударна клетка, която позволява възпроизводимо записване на спектъра и по-сигурна идентификация на компонентите за търсене в библиотеката. Взаимозаменяемите йонни източници (съдържание на източник на ...