A) Presentatie van de uit te voeren taken: Het doel van het project is het verwerven en exploiteren van een reeks instrumenten die geschikt zijn voor het identificeren/karakteriseren van nieuwe natuurlijke (plant-, schimmel- en bacteriële) organische verbindingen en organische verbindingen die worden geproduceerd door chemische synthese, hun conjugaten (richtlijnende derivaten, colloïdale nanodeeltjes) en hun metabolieten, alsook voor het onderzoeken van veranderingen op eiwitniveau (proteomica) in cellen als gevolg van de invloed van verbindingen. Bij de behandeling van zowel tumor- als herinfectieziekten van microbiële oorsprong kan een belangrijke doorbraak worden gemaakt door middel van zogenaamde gerichte therapie, die de selectiviteit van werkzame stoffen verhoogt en de bijwerkingen ervan vermindert. Het gemeenschappelijke kenmerk van deze nieuwe richting van farmaceutisch onderzoek is het creëren van verbindingen die in staat zijn om de werkzame stof in de aangetaste tumor of geïnfecteerde cel te richten. De te ontwikkelen infrastructuur is gericht op de isolatie, identificatie en karakterisering van nieuwe natuurlijk geproduceerde biologisch actieve verbindingen (conjugaten met peptide en/of nanosystemen) die worden geproduceerd door organische chemische synthese, in overeenstemming met de hoogste internationale normen. De overgrote meerderheid van de biologisch werkzame stoffen die momenteel in de geneeskunde worden gebruikt, zijn secundaire metabolieten van planten, schimmels en procaryote-micro-organismen of zijn verwante halfsynthetische synthetische verbindingen. Een van de belangrijkste doelstellingen van ons onderzoek is het identificeren en karakteriseren van nieuwe werkzame stoffen en metabolieten van plantaardige, schimmel- of micro-organismen. Met deze infrastructurele ontwikkeling willen we de mogelijkheid van het ontdekken van aanvullende medicinale en toxische plantaardige werkzame stoffen en het karakteriseringsprofiel van de verbindingen verbreden. In de loop van het onderzoek definiëren we niet alleen een werkzame stof van een organisme, maar ook een steeds fundamentelere „metabolietenafdruk” in de internationale praktijk. Het is belangrijk op te merken dat, volgens sommige hypothesen, de meeste van de voorheen onbekende werkzame stoffen effectief kunnen worden geïdentificeerd en gekenmerkt door deze strategie. Om soortgelijke redenen is metabole karakterisering van metabole producten van microben die in extreme omstandigheden leven veelbelovend (professioneel verantwoordelijke: Instituut voor Biologie, Departement Plantenorganologie, Departement Microbiologie). De meeste bioconjugaten die geschikt zijn voor gerichte therapie bestaan uit drie componenten; werkzame stof, regulerend molecuul en interconnecterende eenheid. In ons onderzoek proberen we samengestelde winkels te creëren waarin de werkzame stof (natuurlijk of gesynthetiseerd) en de controle van peptide componenten kunnen worden gekoppeld in een breed scala van combinaties met de ontwikkelde bifunction linkers, waardoor het bereik van conjugaten die geschikt zijn voor gerichte therapie kan worden vergroot, wat ook een voorwaarde kan zijn voor gepersonaliseerde genezing. Naast de identificatie en karakterisering van de geproduceerde componenten en de daaruit geproduceerde conjugaten, zijn de stabiliteit, het metabolisme en veranderingen in eiwitniveau in biologische systemen ook essentieel voor het meten van hun zeer doordringbare, zeer verstorende analyseplatform (professionele operator: Instituut voor scheikunde, MTA-ELTE Peptidchemical Research Group). De bovengenoemde twee onderzoeksgebieden zijn gezamenlijk afhankelijk van het nieuw aangeschafte „cutting edge” UHPLC-MS/MS-apparaat, dat niet alleen geschikt is voor eenvoudige routineanalyses, maar ook een aanzienlijk onderzoekspotentieel heeft. De kwalitatieve en kwantitatieve analyse van de bestanddelen van de monsters kan worden uitgevoerd met behulp van een systeem (HPLC-MS/MS) dat is gekoppeld aan vloeistofchromatografie (HPLC) dat is ontworpen voor verkrijging, zodat de massa met een hoge nauwkeurigheid kan worden bepaald, met quadrupol- en orbitrapmassadetectie. De hoeveelheid te testen onderdelen kan variëren in orde van grootte. Het systeem is geschikt voor het uitvoeren van ultra-efficiënte vloeistofchromatografie (UHPLC) tests, waardoor de meettijd aanzienlijk wordt verkort, waardoor het aantal monsters wordt verhoogd dat kan worden verwerkt en het gebruik van oplosmiddelen wordt verminderd. De identificatie en kwantificering van gescheiden stoffen wordt geleverd door een diode array detector (190-800 nm), hoge resolutie massaspectrometrie detectie door de hybride quadrupol-orbitrap massaspectrometer. Werkend over een breed massabereik (m/z 50-2000) met hoge precisie (minder dan 5 ppm) massaspectrometers maken ook structurele identificatie en identificatie van het verontreinigingsprofiel mogelijk door het verstrekken van een unieke gevoeligheid (attogram). M...